Transwell及Insert小室產(chǎn)品選擇及使用指南

? 實驗細胞貼壁生長時的直徑可能接近20μm，在進行遷移、侵襲實驗時使用8μm孔徑小室，細胞能順利穿膜嗎？

細胞在遷移、侵襲實驗時，受到趨化因子的吸引，會擠壓自身以穿過膜上的小孔，并非以貼壁生長時的鋪展?fàn)顟B(tài)穿膜。相反，如果孔徑過大，不利于細胞貼壁，也容易使細胞直接落入下室，無法正常進行實驗。目前我司提供的小室產(chǎn)品最大孔徑為8μm，能夠滿足大多數(shù)較大細胞（如多數(shù)腫瘤細胞）穿膜的需求。

? 如何挑選小室膜的材質(zhì)？
        Transwell小室有聚碳酸酯（Polycarbonate, PC），聚酯（Polyesteror PolyethyleneTerephthalate，PET）以及聚四氟乙烯（Polytetrafluoroethylene，PTFE）三種膜材質(zhì)。

PC和PET膜材質(zhì)應(yīng)用都很廣泛，二者的主要區(qū)別在光透性方面，即PC膜半透明，不太方便在培養(yǎng)的過程中觀察上室細胞的形態(tài)；PET膜透明，方便在相差顯微鏡下觀察細胞的狀態(tài)。

另外，在0.4μm孔徑下，PC膜和PET膜的孔密度（單位面積上的孔數(shù)量）不同，PC膜提供更高的膜孔密度。

您可根據(jù)對實驗的要求（是否需要觀察細胞狀態(tài)，是否需要更高孔密度的膜）來選擇。

與PC、PET膜相比，PTFE膜是使用較少的一種材質(zhì)。PTFE膜的Transwell-COL小室包被有等摩爾數(shù)混合的I型和III型牛胎盤膠原，可以促進細胞的貼附和伸展，容許細胞在培養(yǎng)狀態(tài)下（濕潤后）觀察。

此外，PC、PET膜上的孔均為蝕刻的小孔，有著額定的孔密度，在鏡下可以觀察到。而PTFE膜上的孔為拉伸形成，在三類膜中只有膠原包被的PTFE膜沒有確定的孔密度，因為PTFE膜為拉伸形成，是具有曲折孔道的膜。

需要注意是，同孔徑的PET膜小室產(chǎn)品，各品牌的膜孔密度有些許差別，不會影響進行同一種應(yīng)用，但在耗材轉(zhuǎn)換時，建議您預(yù)先進行平行實驗，以確認具體結(jié)果的匹配性。